上皮细胞是什么意思 上皮细胞如何培养?上皮组织分为被覆上皮、腺上皮和感觉上皮三类,而通常所说的上皮就是指被覆上皮。
上皮细胞是位于皮肤或腔道表层的细胞。上皮细胞根据器官的不同而有所不同:尿常规的上皮细胞,是衰亡、脱落的皮细胞,没有很特定的指向意义。
上皮细胞如何培养?
表皮细胞培养
1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。
2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。
3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。
4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。
5.温消化:取出表皮单独处理,用剪刀剪成更小的块后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分钟。
6.用吸管轻轻反复吹打,使成细胞悬液。
7.培养液:通过80目不锈钢纱网滤过后,低速离心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成细胞悬液,接种入碟皿中,CO2温箱培养。
乳腺组织培养
直接培养法:(适于培养含纤维少的软组织)
1.在含有少量培养液或Hanks液的容器中,用锋利刀片将组织反复切割成碎块。
2.把组织碎块连同液体注入离心管中,再补加少许培养液,用吸管吹打片刻,置试管架3~5分钟。吸除上层液可排除非乳腺细胞部分。重复2~3次。
3.末次处理结束后,向沉降管中再补加培养液,用吸管稍吹打,使沉降物重悬。不待细胞团块下降立即通过3~4层无菌纱布滤入另管中。
4.调整好适宜密度,接种入培养瓶中培养。胶原酶消化法:(适于处理含纤维多的较硬组织)其过程与培养其它组织相同。
胃上皮细胞培养
1.取材:取胃溃疡或胃癌手术切除胃标本远端非病变区粘膜少许。
2.清洗:用含庆大霉素(400微克/毫升)和二性霉素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗后,用钝器剥离下粘膜,剪成1mm3大小。
3.消化:在I型胶原酶和透明质酸酶中,于37℃中消化80分钟。
4.离心:收集细胞悬液,800转/分离心后,Hanks液漂洗两次。
5.接种:末次离心后加入含有1%~2%胎牛血清的**培养基,接种入不同孔数的培养板中,接种量依不同实验目的而定。
上皮细胞是什么意思 上皮细胞如何培养?温馨提示:上述就是为大家介绍的上皮细胞的培养方法以及定义。上皮细胞除了上述培养方法之外,还有内皮细胞培养、毛细血管内皮细胞培养等方法。
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