载脂蛋白b偏高什么原因载脂蛋白b如何检查?

　　载脂蛋白b偏高什么原因载脂蛋白b如何检查?专家指出：20～60岁的年龄段约升高20%，肥胖(体重过载)升高，在女性用促黄体生成素可使结果升高19%左右。而且常见于高脂蛋白血症、糖尿病、动脉粥样硬化、心肌梗塞。那么载脂蛋白b如何检查?

　　(1)浇板：每板用10g/L琼脂糖10ml，沸水浴中融化，混匀，冷至50～55℃时加入apoA Ⅰ抗血清50μl，apoB抗血清8μl(用量视抗血清效价而定)，迅速混匀后倒在预置在水平台上的玻璃板上，冷后放在4℃，20min后打孔，孔在板的阴极端，孔径3mm，孔间距至少5mm，孔容量5μl。把板放入电泳槽，用滤纸搭桥。

　　(2)稀释抗原：用0.15mol/L NaCl液将校准血清稀释成1∶100，1∶150，1∶200，1∶300，及1∶400(作校准曲线之用)，血清标本按1∶200稀释，放4℃冰箱不得超过3天。

　　(3)加样：在低电流状态(10mA/板)将稀释好的定值血清及标本分别吸取5μl(**)，加入琼脂糖凝胶加样孔内。每板都要做一系列标准。

　　(4)通电：稳流24mA/板，端电压6～8V/cm，以流水冷却使琼脂糖保持15℃，电泳3～4h。

　　(5)脱杂蛋白及制干胶膜：电泳后的琼脂糖板浸泡在0.15mol/L NaCl中30min，将胶膜托置于聚酯薄膜上，用多层滤纸在轻轻加压下吸干胶内水分，然后将滤纸、胶膜与聚酯膜三者一起自然干燥，或用热吹风器吹干，干后胶膜会自然与滤纸及聚酯膜分开。

　　(6)染色：将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20～30min。

　　(7)脱色：用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰，背景基本无色。可在水中用两片玻璃纸将胶膜夹住，晾干后可长期保存。也可以用流水浸泡脱色至背景干净。